Ved portene til Madrid sidder Don Guan og hans tjener Leporello. De venter her på natten med at komme ind i byen under hendes dækning. Skødesløs Don Guan mener, at han ikke vil blive genkendt i byen, men den ædru Leporello er sarkastisk bortset fra dette. Dog kan ingen fare stoppe Don Guan. Han er sikker på, at kongen, når han har hørt om hans uautoriserede tilbagevenden fra eksil, ikke vil henrette ham, at kongen sendte ham i eksil for at redde adelsmanden, som han havde dræbt fra hævn. Men han er ikke i stand til at blive i eksil i lang tid, og mest af alt er han utilfreds med de kvinder der, der forekommer ham voksdukker.
Når man kigger rundt, finder Don Guan området ud. Dette er Anthony-klosteret, hvor han mødtes med sin elskede Ineza, som viste sig at være en jaloux mand. Don Guan inspirerede poetisk hendes træk og et trist look. Leporello forsikrer ham om, at Don Guan havde og stadig vil være elskere. Han undrer sig over, hvem denne gang hans mester vil være på udkig efter i Madrid. Don Guan har til hensigt at søge efter Laura. Mens Don Guan drømmer, vises en munk, der, når de ser de besøgende, undrer sig over, om de er folk fra Don Anna, der er ved at komme her til graven af sin mand, kommandant de Solva, der blev dræbt i en duel af den "skrupelløse, gudløse Don Guan" , som munken kalder ham, og har ikke mistanke om, at han taler med Don Guan selv. Han siger, at enken opførte et monument til hendes mand, og hver dag kommer han for at bede om fred i sin sjæl. Don Guan synes enkens adfærd er underlig, og han spekulerer på, om hun er god. Han beder tilladelse til at tale med hende, men munken svarer, at Don Anna ikke taler med mænd. Og på dette tidspunkt vises Don Anna, munken låser risten op, og den passerer, så Don Guan ikke har tid til at undersøge den, men hans fantasi, der ifølge Leporello er "mere smidig end en maler", kan tegne hendes portræt. Don Guan beslutter at møde Don Anna, Leporello skammer sig over sin helligdom. Under samtaler bliver det mørkt, og herren med tjeneren går ind i Madrid.
Gæster spiser middag i Lauras værelse og beundrer hendes talent og inspirerede skuespil. De beder Laura om at synge. Selv den dumme Carlos ser ud til at blive rørt af hendes sang, men når han får at vide, at ordene i denne sang er skrevet af Don Guan, som var Lauras elsker, kalder Don Carlos ham en ateist og en jævel. Den vrede Laura råber, at hun nu beordrer sine tjenere til at dræbe Carlos, selvom han er en spansk grand. Frygtløs Don Carlos er klar, men gæsterne beroliger dem. Laura mener, at grunden til Carlos's brutale trick er, at Don Guan dræbte Don Carlos's bror i en ærlig duel. Don Carlos indrømmer, at han tog fejl, og de stillede op. Laura synger en anden sang på den generelle anmodning og siger farvel til gæsterne, men beder Don Carlos om at blive. Hun siger, at han med sit temperament mindede hende om Don Guan. Laura og Don Carlos taler, og på dette tidspunkt er der et bank, og nogen ringer til Laura. Laura låser op og Don Guan går ind. Carlos, der hører dette navn, kalder sig selv og kræver en øjeblikkelig kamp. På trods af Lauras protester, kæmper de storslåede, og Don Guan dræber Don Carlos. Laura er forvirret, men efter at have hørt, at Don Guan netop i hemmelighed var vendt tilbage til Madrid og straks skyndte sig hen, blødgøres.
Efter at have dræbt Don Carlos skjuler Don Guan sig i en klosterform i Anthony Kloster og stod ved kommandantmonumentet tak for hans skæbne, at hun således gav ham muligheden for at se den dejlige Don Anna hver dag. Han har til hensigt at tale med hende i dag og håber, at han vil være i stand til at tiltrække hendes opmærksomhed. Når man ser på statuen af kommandanten, er Don Guan ironisk, at den myrdede mand her er repræsenteret som en kæmpe, skønt han var bange i livet. Don Anna kommer ind og lægger mærke til en munk. Hun beder om tilgivelse, der forhindrede ham i at bede, som munken svarer, at det var hans skyld foran hende, fordi hendes sorg blev forhindret i at "frit strømme ud"; han beundrer hendes skønhed og ængsomme mildhed. Sådanne tal overrasker og forvirrer Don Anna, og munken indrømmer uventet, at adelsmanden Diego de Calvada, et offer for en ulykkelig lidenskab for hende, gemmer sig under denne kjole. Med fyrige taler overtaler Don Guan Don Anna om ikke at køre ham, og pinligt Don Anna inviterer ham til at komme til hendes hus næste dag, forudsat at han vil være beskeden. Don Anna forlader, og Don Guan kræver, at Leporello inviterer kommandantens statue til morgendagens møde. For den skyløse Leporello ser det ud til, at statuen nikker som svar på dette hellige bud. Don Guan gentager selv sin invitation, og statuen nikker igen. De forskrækkede Don Guan og Leporello forlader.
Don Anna i sit hus og taler med Don Diego. Hun indrømmer, at Don Alwar ikke var hendes valgte, at hendes mor tvang hende til dette ægteskab. Don Diego er jaloux på kommandanten, som til gengæld for tom rigdom fik ægte lykke. Sådanne indlæg forvirrer Don Anna. Hun bebrejder ideen om en afdød mand, der aldrig ville have vært vært for en kvinde i kærlighed, hvis han havde været en enkemand. Don Diego beder hende om ikke at plage sit hjerte med evige påmindelser om hendes mand, skønt han fortjener henrettelse. Don Anna er interesseret i hvad nøjagtigt Don Diego var skyld i, og som svar på hendes insisterende anmodninger afslører Don Guan for hende sit rigtige navn, navnet på morderen på hendes mand. Don Anna er forbløffet og mister sine sanser under påvirkning af hvad der skete. At komme sig, kører hun Don Guan. Don Guan er enig i, at rygtet ikke forgæves fremstiller ham som en skurk, men forsikrer, at han blev genfødt efter at have oplevet kærlighed til hende. Som et farvel for farvel før adskillelse beder han om at give ham et koldt fredeligt kys. Don Anna kysser ham, og Don Guan kommer ud, men løber straks tilbage. Efter ham følger en statue af kommandanten, der dukkede op under opkaldet. Kommandøren beskylder Don Guan for fejhed, men han rækker modigt med et håndtryk til en stenskulptur, hvorfra han omkommer med navnet Don Anna på læberne.